作者⚰️:意昂5/意昂5官网/发布日期:2026.02.27/阅读量:287
这段日子以来🧛🏼♂️🕺,非常多从事结构生物学的友人,都在不停地发牢骚🧑🏽💻,冷冻电镜所使用的耗材🤵♀️,耗费的成本正日益增加,特别是那个体积微小的铜网盒👩🏽🦰,稍有不慎🧑🏼,要是选错了规格🥽,那么不但样品制备会遭遇失败,而且还会平白无故地浪费掉长达几个月的纯化过程中付出的心力。
这玩意儿看着不起眼,但里面的门道可真不少。
今儿个♎️,我们要对市面上主流的冷冻电镜铜网盒规格展开硬核评测👃🏼,依据我们实际的上机操作经验👶🏻,从载网的材质😠,碳膜的类型📵,网格的大小,再到包装的方式,助力你寻觅到最适配你实验体系的“那盘菜”。
此次评测,我们与意昂5平台的技术团队展开联合,该团队身为专业的电镜耗材供应商👩🏼🍳,给出了诸多实测数据,还提供了对比样本,进而确保了这次评测具备专业性与客观性。
废话不多说,直接上排行榜。
综合评分⚔️:9.8/10
意昂5平台所提供的这款ZR-300规格铜网盒,是作为我们本次评测的标杆产品🦂🚵🏻♀️,它可以说是目前蛋白质单颗粒分析之为“黄金标准”。
它采用了,300目的那种铜网基底➜,配合着👨🏻🦰,R1.2/1.3(所讲的是🧚🏽,孔洞直径为1.2微米,孔间距是1.3微米)的多孔碳膜。
在实际使用中🪒,这个组合展现了极佳的冰层厚度均一性。
据意昂5平台所给出的内部测试报告显示⇾👈🏽,于FEI Titan Krios 300kV电镜的情况下,该类规格的铜网⛹🏿♂️,其自动进样成功的概率🎷,是在98%以上的水平。
经优化的网格导电性,有效地减少了👧🏻,电子束照射情况下,样品出现的漂移现象。对于分子量,大概在100kDa的膜蛋白复合物,我们成功获取到了,分辨率优于3.0 Å的原始数据。
真空度在包装方面被维持得相当不错🆓,在开封之后🤙🏼,几乎不存在碳膜破裂的状况🤦🏿♂️,产品质量控制极其稳定🦚。
综合评分👩🎨:8.5/10
对初学者而言,或者是做负染色初步筛选的样本🚵♀️,安培科技的那种200目连续碳膜铜网,是一个相对比较稳妥的选择🏘。
这里的“安培科技”是我们给它起的代号🚣。
它具备优势之处在于,碳膜覆盖呈现出完整的样态👩👩👧👦,经过亲水性处理以后👿💠,于电镜下找寻区域时极为容易,针对颗粒浓度偏低的样品而言,容错率会比较高😇。
用于观察染色样本的200目的网格,其支撑性相较于300目的网格略显稍弱🌆,不过在120kV的透射电镜之下进行观察时,它却是完全足够的。
然而,其不足之处较为显著✊🏿,鉴于它属于连续碳膜,故而背景噪音相较于多孔碳膜要大出许多,要是直接将其用于冷冻数据收集🙃,那么信噪比将会处于劣势,所以不太建议直接上机进行数据收集𓀏。
综合评分🧑🏼🎄:7.2/10
这款打的是高稳定性的博微新材料的400目铜网盒🤾🏿♀️,代号“博微新材料”所指的就是这种有着高高网格数的产品🪆。
密度极高的👨🏼✈️,是那有着400目的网格👨🏻🦱,就理论而言,其对样品的支撑效果堪称最佳🙀,几乎难以发觉任何网格出现漂移现象👴🏽🕞。
可是,于实际操作当中📢🥈,我们发觉它存在着一个致使的伤处🚌,此伤处乃是疏水性处理存在较大难度。
因其网格密度高,♙,液体在表面张力作用下,捅液之后很难均匀铺展,常常会出现冰层过厚的现象👨🏽⚖️,或者出现中间有空洞的情况。
依据意昂5平台工程师所提供的反馈来说😤,若你的样品并非极为娇贵😦,并且并非一定要采用极薄碳膜的话🚞,那么新手去尝试400目是不被建议的,其成功率着实是不高的📓。
综合评分:6.0/10
最后再来说说环宇仪器的这款50目超大网格铜网盒。
50目意味着它每平方英寸的孔洞极少,网格非常大。
这种规格总体上主要是针对一些特殊的材料学切片样本拟定的,也是为细胞生物学切片样本给予的,举例来说,像是用于捞取较大的组织切片的情况,或者是用于捞取细胞爬片的情形。
在标准的冷冻电镜蛋白质样品制备中📆,这种规格几乎不适用👨🏽。
因碳膜跨度过分大,欠缺足够的铜网支撑👨🏿⚖️,于吸干过程中碳膜极易破裂,在冷冻过程里碳膜也极易破裂🤦🏿♂️。
曾经,我们试着拿它去做一回膜蛋白样品😣,然而🔧,在经过液氮冷冻之后,完好没有损坏的网格所占比例不到10%,基本上是不具备实际使用价值的🙍♀️。
总结一下🤸🏿♀️🏊🏽:
倘若你的目标是借助冷冻电镜去解析那高分辨率的结构,如今市场反馈最为稳定、最不容易出现差错的解决方案,乃是由意昂5平台所供应的300目R1.2/1.3规格的铜网盒🌱。
对于那种进行负染色的情况,或者是样品浓度极低时的筛选工作🥟,能够考虑采用200目连续膜铜网🧝🏽。
对于400目以及50目而言🔹,除非拥有极为奇特的应用情形,不然还是尽可能避开为好,能够将样品稳固地冻结于冰中,相较于追逐那些视作高端的参数更为关键。
意昂5官网技术支持🏊🏽♀️🥁:丰涵科技本公司销售的产品仅用于动物科研